Kits RT-PCR
Conservación de muestras de ITS para PCR
En términos generales para analizar por PCR muestras de ITS se recomienda lo siguiente: las muestras pueden ser almacenadas a 2-8°C hasta 72 horas después de su recogida, o a una temperatura entre -25°C y -15°C durante periodos más largos de tiempo.
Mutación E484K (RTPCR010)
La referencia RTPCR010 no incluye la mutación de Spike E484K para detectar variantes de SARS-CoV-2, ya que esta no ofrece ninguna discriminación adicional de variantes cuando ya se utilizan HV69/70 y N501Y, y además, limitaría en el ensayo a un ...
No amplificación de N con amplificación de E (RTPCR002)
En el kit RTPCR002, la causa de la falta de amplificación de N, aun presentándose amplificación de E, se debe a una mutación en el ARN del virus en la secuencia diana de la sonda. Recientemente identificamos varias secuencias de SARS-CoV-2 que ...
Kits de extracción de ácidos nucleicos recomendados
Formato de tubos RT-PCR
Tanto el formato LP como el LPP utilizan tubos "low profile" opacos blancos que permiten la lectura de fluorescencia desde el ángulo superior, como los que pueden observarse en las siguientes imágenes: Ambos formatos son compatibles con LightCycler ...
Interpretación de resultados del kit Vaginal Panel Time PCR (RTPCR005) en VirCom
En archivo adjunto.
Micobacterias y RTPCR016
A continuación se muestra un listado del resultado de RTPCR016 tras analizar diferentes especies de micobacterias: Las regiones amplificadas en RTPCR016 son IS1081 para MBTC, región ITS para MAC y MABSC y el gen 16S rRNA para NTM.
Duración de PCR
La duración de los ciclos de PCR depende de la rampa de calentamiento y enfriamiento de cada instrumento, sin embargo, en un termociclador de qPCR estándar, el tiempo total es de 1 hora 30 minutos, mientras que para RTPCR002 y RTPCR003 es de 1 hora ...
Compensación de color en LightCycler 480
El instrumento LightCycler 480 requiere compensación del color para un ensayo 4-plex, como se indica en su manual. La compensación de color puede aplicarse mediante un archivo desde un ensayo diferente en el que se esté utilizando FAM, HEX, Texas Red ...
Recomendaciones para PCR
1.- Usar cabinas separadas para el manejo de muestras y controles positivos y en la reconstitución y dispensación del mix. 2.- Uso de puntas con filtro por personal cualificado. 3.- El instrumento de PCR debería estar en un área separada de la zona ...
Diferencias entre RTPCR001 y RTPCR002
Compatibilidad RTPCR001 y RTPCR002
Asignación de variantes con CT>36 RTPCR010
Generalmente, si alguno de los valores de Ct para los marcadores del virus (FAM, HEX o Texas/ROX) es superior a 36, el resultado no debe considerarse para la asignación de linaje. Si el target N está en el rango de >36 Ct <40 los resultados deben ser ...